ABSTRACT
El sistema DAVIH-HTLV-I del Laboratorio DAVIH (La Habana, Cuba) para la confirmación del diagnóstico serológico de anticuerpos contra el HTLV-I/II se evaluó frente a 223 sueros de individuos que representan diferentes grupos de riesgo, de ellos 47 confirmados seropositivos al HTLV-I, 86 muestras tomadas de pobladores de áreas endémicas, 52 de donantes de sangre, 16 de seropositivos al VIH-1, 16 de pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) con anticuerpos anti-DNA y 6 con anticuerpos contra antígenos HLA clases I y II. Se cumplieron los criterios de confirmación como positivos en 46 de las 47 muestras y una resultó indeterminada. Entre los pobladores de áreas endémicas se encontró el 18,6 porciento de muestras positivas y el 19,7 porciento de indeterminadas, con una alta frecuencia de reactividad frente a la p24. En los donantes de sangre ninguna muestra fue positiva y el 5,77 porciento de indeterminados, con reactividad frente a la p19 y p24. En el resto de las muestras no hubo casos positivos ni indeterminados. Además, se comparó este sistema confirmatorio con el sistema HTLV-I Western blot de la firma Diagnostic Biotechnology (Singapur) y se obtuvo una concordancia del 95,6 porciento
Subject(s)
Blotting, Western , Human T-lymphotropic virus 1 , Serologic TestsABSTRACT
Las glicoproteínas de 41 KD y 120 KD de la envoltura del virus de inmunodeficiencia humana tipo I (VIH-1) se emplean ampliamente en el desarrollo de medios diagnósticos, y con este fin se purificaron a partir de células infectadas tratadas con desoxicolato de sodio al 1 porciento, por cromatografía de afinidad sobre lentil-lectina Sefarosa 4B. El procedimiento resultó eficiente y sencillo. Durante este proceso se recuperaron 3,375 mg y las proteínas purificadas no perdieron, en el proceso de purificación, sus propiedades inmunogénicas y antigénicas, al reaccionar frente a un suero positivo al VIH-1 y frente a anticuerpos monoclonales. Los antisueros obtenidos de estas glicoproteínas en ratones alcanzaron títulos de trabajo de hasta 1:32 000 por ELISA. Los pesos moleculares determinados por tinción con nitrato de plata, mostraron valores muy cercanos a los reportados
Subject(s)
HIV/isolation & purification , /isolation & purification , Chromatography, AffinityABSTRACT
En el seguimiento de las personas afectadas con el VIH-1 resulta de gran utilidad el empleo de sistemas para detectar la presencia de proteina de 24 KD y los niveles de anticuerpos a esta; para el desarrollo de estos sistemas es necesario contar con esta proteina purificada. El presente trabajo describe la purificacion de p24 a partir de lisado rival semipurificado sobre gradiente de sacarosa, empleando cromatografia de inmunoafinidad con anticuerpos monoclonales acoplados a Sefarosa 4B activada con bromuro de cianogeno. Para la caracterizacion del producto purificado se utilizo electroforesis en gel de poliacrilamida con tincion de plata e inmunoelectrotransferencia. Como resultado de este trabajo se obtuvo p24 util para ser empleada en el desarrollo de medios diagnosticos y anticuerpos monoclonales